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液相色譜儀過濾技巧
發布時間:2016-01-26   點擊次數:2444次

任何顆(ke)粒(li)物進進液相色譜(pu)(pu)儀(yi)后都會在柱(zhu)子進口(kou)端被篩板(ban)擋(dang)住,zui后的(de)結(jie)果是將柱(zhu)子堵塞,表(biao)現出的(de)特征是系統壓力增加并(bing)使色譜(pu)(pu)峰變形(xing)。因此(ci),要采取各種預防 措施,包(bao)括操縱步驟(zou)和商品儀(yi)器自身的(de)各種過濾設(she)計(ji),努力防止或減(jian)少(shao)顆(ke)粒(li)物進進液相色譜(pu)(pu)儀(yi)中,從而(er)延長儀(yi)器和色譜(pu)(pu)柱(zhu)的(de)使用壽命,并(bing)進步數(shu)據的(de)可靠性(xing)。

在液相色譜儀中,顆粒物的主要來源有三個途徑:活動相、被測樣品和儀器系統部件的磨損物。
  
  1、被測樣品
  使用針筒式過濾器不可能100%得到通過過濾器的被測樣品,總會或多或少的丟失。丟失來自這樣幾方面:過濾器濾膜的吸附、過濾器濾出的顆粒物上的吸附、針筒式濾膜過濾器與針筒連接處的滲漏等。  
  2、活動相
  
   無論是液相色譜儀HPLC級的水還是在實驗室使用超純水凈化系統制備的水,zui后一步也是通過0.2μm微孔濾 膜。任何一種緩沖液中加進了固體物,必然活動相過濾將。少量雜質顆粒存在于活動相中必然成為殘渣。
  
  解決辦法:2. 1.活動相制備僅采用HPLC級液體時不需要過濾,反之所有活動相組成在使用前必須過濾。
  
  2.2在連接儲液瓶和泵的輸液管的末端進口采用下沉式過濾器(常見材質有熔融玻璃砂芯濾板和微孔金屬的兩種)也是很重要的。這個過濾器的規格為≥10μm的微孔物質,所以它不能取代活動相過濾步驟,但是它能除往系統中的塵土并保證儲液瓶、輸液管使用的可靠性。
  2.3.推(tui)薦在(zai)HPLC系(xi)統(tong)中采(cai)用一(yi)個(ge)0.45 或0.5μm的在(zai)線多(duo)孔過濾(lv)(lv)器,接在(zai)自動進樣器和柱子之(zhi)間(jian),即使(shi)(shi)已使(shi)(shi)用了保護柱。這個(ge)在(zai)線過濾(lv)(lv)器將(jiang)成為擋板(ban)(ban)代替柱頭的濾(lv)(lv)板(ban)(ban),而且如(ru)采(cai)用一(yi)個(ge)玻(bo)璃砂芯濾(lv)(lv)板(ban)(ban), 既便(bian)宜,更換又(you)方便(bian)(幾(ji)分鐘就可更換)。若采(cai)用在(zai)線過濾(lv)(lv),液相色譜(pu)儀檢測每(mei)批樣品(pin)開(kai)始前記(ji)錄下壓(ya)力值(zhi),當壓(ya)力上升(sheng)一(yi)定值(zhi),例如(ru)25%或增加(jia) 500psi,應該更換玻(bo)璃砂芯濾(lv)(lv)板(ban)(ban)了,更換以后沖(chong)洗幾(ji)分鐘系(xi)統(tong)將(jiang)恢復到原來的壓(ya)力值(zhi)。


  3、儀器系統部件的(de)磨損物
  
  zui后(hou),在液相(xiang)色譜儀HPLC系統(tong)中顆粒物的(de)另(ling)一個(ge)主要(yao)來(lai)源是輸液泵密封(feng)墊和進樣(yang)閥旋轉(zhuan)軸的(de)磨損。關于(yu)輸液泵密封(feng)墊的(de)磨損更換有兩種不(bu)同(tong)建議(yi)。
  
3.1、在一般實(shi)驗室中(zhong)輸液泵密封(feng)(feng)墊通常使用壽(shou)命為六個(ge)月到一年,因(yin)此建議半年或一年更(geng)換這些密封(feng)(feng)墊。  
3.2、原裝(zhuang)密(mi)封(feng)墊的密(mi)封(feng)效(xiao)果,更換以后輕易引起活動相滲漏(lou)。所以,只要不漏(lou)液就不要輕易更換密(mi)封(feng)墊。
  

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