色譜柱是液相色譜的心臟,在液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透粉性,延長柱子的使用壽命非常重要。因此對液相色譜柱的維護是關鍵。因為樣品中經常會含有能夠吸附在色譜柱固定相上的雜質化合物,所以應該經常對色譜柱進行清洗或沖洗。當色譜柱在多次進樣后顯示出柱效降低時,有必要采用適當的流動相對色譜柱進(jin)行處理,沖洗(xi)除去吸附(fu)在固定相上的(de)污染物和樣(yang)品殘余(yu)物。
方法如下:
1.將色譜柱從系統上取下,反向連接到輸液泵上。色譜柱出口(kou)不(bu)要(yao)連接到檢(jian)測 器上(shang),以免污(wu)染檢(jian)測器流(liu)動池。
注意:大多數的硅膠基質色譜柱反相沖洗沒有問題,但是聚合物基質色譜柱并不能如此(ci)操(cao)作,在反相(xiang)沖洗(xi)色譜柱之前(qian)后與色譜柱生(sheng)產商確(que)認,反向(xiang)沖洗(xi)流動相(xiang)流速不要太(tai)大。
2.沖洗(xi)溶劑的選擇(ze)要考慮分析的樣品和使用的流動(dong)相條(tiao)件,一般清洗(xi)流動(dong)相強(qiang)度應該比流動(dong)相更強(qiang),但是條(tiao)件應該盡(jin)可能的溫和。
A. 用適當的溶劑沖洗色譜柱的鹽和強添加劑。
B. 用(yong)比(bi)分(fen)析流(liu)動相(xiang)更強的溶(rong)劑沖洗,該溶(rong)劑與流(liu)動相(xiang)組成相(xiang)同但不(bu)含鹽和酸(suan)。
C. 如果認為B沒能*清洗干凈色譜柱,用100%zui強溶劑(ji)沖洗。
在清洗色譜柱時,用與(yu)流動(dong)相(xiang)組成相(xiang)同的溶劑(ji),但是如果使用其(qi)他(ta)的溶劑(ji),重要的是要考慮到(dao)溶劑(ji)之(zhi)間(jian)的互溶性,另外不要用強酸和強堿。
下圖是采用不同洗脫能力的流動相沖洗色譜柱時(shi)的色(se)譜圖,可(ke)見色(se)譜柱上(shang)的雜質逐漸被洗(xi)脫(tuo)下來。