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液相色譜柱的使用注意事項
發布時間:2016-04-29   點擊次數:1796次

1 液相色譜(pu)柱的使用說明:

 

  ( 1 ) 液相(xiang)色(se)譜(pu)柱(zhu)色(se)譜(pu)柱(zhu)使用(yong)前注意(yi)事項:

 

  液(ye)(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)柱的(de)(de)儲存(cun)液(ye)(ye)無特殊說明,均為(wei)評(ping)價報告所示的(de)(de)流(liu)(liu)動相(xiang)。在(zai)使(shi)用前,一定(ding)要注意(yi)液(ye)(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)柱的(de)(de)儲存(cun)液(ye)(ye)與要分析(xi)樣品的(de)(de)流(liu)(liu)動相(xiang)是否互(hu)溶。在(zai)反相(xiang)色(se)譜(pu)中,如用高濃度的(de)(de)鹽或緩(huan)沖液(ye)(ye)作洗(xi)脫劑,應先用10 %左(zuo)右的(de)(de)低濃度的(de)(de)有(you)機(ji)相(xiang)洗(xi)脫劑過渡一下,否則緩(huan)沖液(ye)(ye)中的(de)(de)鹽在(zai)高濃度的(de)(de)有(you)機(ji)相(xiang)中很(hen)容易析(xi)出(chu),堵塞(sai)色(se)譜(pu)柱。

 

  ( 2 ) 流動相:

 

  流動(dong)相(xiang)(xiang)中所(suo)(suo)使用的(de)各(ge)種有機溶劑(ji)要(yao)盡可能使用色譜純(chun),配流動(dong)相(xiang)(xiang)的(de)水是(shi)超純(chun)水或全玻(bo)璃器皿的(de)雙(shuang)蒸(zheng)水。如果將所(suo)(suo)配得流動(dong)相(xiang)(xiang)再經過0.45μm 的(de)濾(lv)(lv)膜過濾(lv)(lv)一(yi)次(ci)則更好,尤其是(shi)含鹽的(de)流動(dong)相(xiang)(xiang)。另外,裝流動(dong)相(xiang)(xiang)的(de)容器和色譜系(xi)統中的(de)在線過濾(lv)(lv)器等裝置(zhi)應該定期清洗或更換(huan)。

 

  以常規硅膠為(wei)基質的鍵合(he)相(xiang)(xiang)填料通常的 ph 值(zhi)適(shi)(shi)用(yong)范(fan)圍(wei)是 2.0-8.0 , bds c18 適(shi)(shi)合(he)于(yu)堿性化合(he)物, ph值(zhi)適(shi)(shi)用(yong)范(fan)圍(wei)為(wei) 2.0-10.0 。當必須要在 ph值(zhi)適(shi)(shi)用(yong)范(fan)圍(wei)的邊界條件下使用(yong)色譜(pu)柱時,每次使用(yong)結束后立即(ji)用(yong)適(shi)(shi)合(he)于(yu)色譜(pu)柱儲存并與所(suo)使用(yong)的流動(dong)相(xiang)(xiang)互溶的溶劑清洗,并*置換(huan)掉原來所(suo)使用(yong)的流動(dong)相(xiang)(xiang)。

 

  ( 3 ) 樣品:

 

  樣品(pin)也要盡可(ke)能清潔(jie),可(ke)選用(yong)樣品(pin)過濾器(qi)或(huo)樣品(pin)預(yu)處理柱(zhu)( spe)對樣品(pin)進行預(yu)處理;若樣品(pin)不(bu)便處理,要使用(yong)保護柱(zhu)。在用(yong)正相(xiang)色譜法分析樣品(pin)時,所有(you)的(de)溶劑和樣品(pin)應嚴格脫水。

 

  2 色譜柱(zhu)的保(bao)存

 

  ( 1 ) 反(fan)相液相色(se)譜柱色(se)譜柱每(mei)天實驗后的保養:

 

  使用緩沖液(ye)或含鹽(yan)的流動(dong)相,實驗完(wan)成后(hou)應(ying)用 10% 的甲(jia)醇 / 水(shui)沖洗(xi) 30 分鐘,洗(xi)掉色(se)譜柱中(zhong)(zhong)的鹽(yan),再(zai)用甲(jia)醇沖洗(xi) 30 分鐘。注(zhu)意:不(bu)能用純水(shui)沖洗(xi)柱子(zi),應(ying)該(gai)在(zai)水(shui)中(zhong)(zhong)加入 10% 的甲(jia)醇,防止(zhi)將填料沖塌陷(xian)。

 

  ( 2 ) 長期保存色(se)譜柱:

 

  如色(se)譜(pu)柱(zhu)(zhu)要長時(shi)間保(bao)存(cun)(cun),必須存(cun)(cun)于合適的(de)溶劑下。對(dui)于反相(xiang)柱(zhu)(zhu)可以(yi)儲(chu)存(cun)(cun)于純甲醇或(huo)乙腈中(zhong),正相(xiang)柱(zhu)(zhu)可以(yi)儲(chu)存(cun)(cun)于嚴格脫水后的(de)純正己烷中(zhong),離(li)子(zi)交換柱(zhu)(zhu)可以(yi)儲(chu)存(cun)(cun)于水(含防腐劑*或(huo)柳硫汞)中(zhong),并將(jiang)購買新色(se)譜(pu)柱(zhu)(zhu)時(shi)附送的(de)堵頭(tou)堵上。儲(chu)存(cun)(cun)的(de)溫度是室溫。

 

  3 色譜柱(zhu)在使用過(guo)程中易出現的問(wen)題和解決(jue)辦法

 

  色譜柱(zhu)(zhu)在使用中(zhong)(zhong)zui常見的問題就(jiu)是(shi)柱(zhu)(zhu)壓(ya)升高,如(ru)果(guo)柱(zhu)(zhu)壓(ya)是(shi)在長時間使用過程中(zhong)(zhong)緩慢增(zeng)加(jia),屬(shu)于正(zheng)常現(xian)象。但柱(zhu)(zhu)壓(ya)在使用過程中(zhong)(zhong)突(tu)然升高(系統管路堵塞及壓(ya)力傳感(gan)器(qi)故(gu)障除外),可能的原因有如(ru)下(xia)幾(ji)點:

 

  ( 1 )色(se)譜(pu)柱頭(tou)的過濾篩板堵塞或污(wu)染;

 

  ( 2 )色譜柱頭的填(tian)料被樣品污染;

 

  ( 3 )色譜柱內緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他(ta)有機溶劑,形成(cheng)結晶析出(chu);

 

  ( 4 )流動相 ph 值過大(da)或(huo)過小使固定相結構(gou)破壞或(huo)溶(rong)解(jie)。

 

  解(jie)決辦法如下(xia):

 

  ( 1 )如確定是色(se)譜(pu)柱頭(tou)的過濾篩板(ban)被污染,可以(yi)將色(se)譜(pu)柱反(fan)方向用甲醇(chun)沖洗至正常壓力,或者卸下色(se)譜(pu)柱頭(tou),將其放在 10%的稀硝酸內超(chao)(chao)聲清洗 10 分鐘,后(hou)再用純(chun)水(shui)超(chao)(chao)聲 10 分鐘,重新裝入色(se)譜(pu)柱。

 

  ( 2)如確定色譜(pu)柱(zhu)頭(tou)(tou)的(de)填(tian)(tian)料(liao)(liao)被污染,將柱(zhu)頭(tou)(tou)螺(luo)絲卸下(xia),挖出柱(zhu)內前段被污染的(de)填(tian)(tian)料(liao)(liao),用相同的(de)柱(zhu)填(tian)(tian)料(liao)(liao)重(zhong)新(xin)填(tian)(tian)入(ru),仔細修(xiu)復后,重(zhong)新(xin)安(an)裝上柱(zhu)頭(tou)(tou)螺(luo)絲。

 

  ( 3 )如確定定是鹽結晶(jing),用 10% 的甲醇 / 水(shui)沖洗色譜(pu)柱(zhu)使柱(zhu)內鹽全(quan)部(bu)溶(rong)解,再換(huan)高濃度甲醇。

 

  ( 4 )如(ru)果因 ph 值使用(yong)不當(dang),很難恢復。

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