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 雞蛋(dan)營養(yang)豐(feng)富，含有蛋(dan)白質(zhi)、脂肪、膽固醇、卵磷脂、維生素、鐵、鈣、鉀等人體需要(yao)的礦物質(zhi)。膽固醇又(you)稱膽甾醇。一種環戊烷多氫菲的衍生物(wu)。早在(zai)18世紀人們(men)已(yi)從(cong)膽石(shi)中發現(xian)了膽固醇，1816年(nian)化學家本歇爾(er)將這(zhe)種具(ju)脂(zhi)類性質的物(wu)質命名為膽固(gu)醇。膽 固(gu)醇(chun)廣泛(fan)存在(zai)于動物體內，尤(you)以腦及(ji)神經(jing)組織中zui為豐富，在(zai)腎(shen)、脾、皮膚、肝(gan)和膽汁中含量也高。其溶解(jie)性與脂肪類似，不溶于水，易溶于乙mi、氯仿等溶劑。膽 固醇(chun)是動物組織(zhi)細(xi)(xi)胞所*的(de)重要物質，它不僅參(can)與形(xing)成細(xi)(xi)胞膜，而且是合成膽汁酸，維生素D以及甾體(ti)激(ji)素的原料。然而(er)有研究人員(yuan)提出，雞(ji)蛋膽(dan)固(gu)醇(chun)含量相對(dui)(dui)較高，過(guo)多攝入雞(ji)蛋會導致人體(ti)血清膽(dan)固(gu)醇(chun)增高，引(yin)發心血管疾病。由此我們對(dui)(dui)雞(ji)蛋中(zhong)膽(dan)固(gu)醇(chun)含量進(jin)行(xing)研究，探索(suo)快速檢測雞(ji)蛋中(zhong)膽(dan)固(gu)醇(chun)含量的方法。

 實驗部(bu)分

1.儀器與(yu)試(shi)劑(ji)

   儀器：Waters液相色譜儀waters 2695（配置高壓泵(beng)，紫外檢測(ce)器(qi)），萬分之一梅特勒電子天平(ping)，渦(wo)旋混合儀，離心(xin)機，超聲(sheng)波清洗器 

   試劑： 膽固醇(chun)標(biao)準(zhun)品，甲(jia)醇(chun)（色譜純(chun)(chun)(chun)），異丙醇(chun)（分(fen)析(xi)純(chun)(chun)(chun)），**（分(fen)析(xi)純(chun)(chun)(chun)），石油(you)醚（分(fen)析(xi)純(chun)(chun)(chun)），無(wu)水乙醇(chun)（分(fen)析(xi)純(chun)(chun)(chun)），市(shi)售普通(tong)雞蛋

2. 色(se)譜條件

    色譜柱：C18色譜(pu)柱 150mm×4.6mm×5μm；流動相：甲醇(chun)-異丙(bing)醇(chun)（4:1，v/v）；流(liu)速：1.0mL/min；溫度(du)：25℃； 進樣量：20μL；檢測(ce)波長：205nm。

3 .標(biao)準溶液配制

    準(zhun)(zhun)確稱取膽固醇(chun)標準(zhun)(zhun)品25mg，于(yu)25ml容量瓶中(zhong)，用無水(shui)乙醇溶解(jie)稀釋至刻度(du)，得膽固醇儲(chu)備液（1.0g/L）。
    取膽固醇儲備液(ye)0.0，0.5， 1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，1.0ml于10ml容量瓶中，無水乙醇(chun)稀釋定(ding)容，的濃度為0，0.05 ，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0g/L 膽固醇標準溶液。

4 .樣品前處理
  取雞蛋(dan)(dan)稱(cheng)重，除(chu)去(qu)蛋(dan)(dan)清，準確稱(cheng)取蛋(dan)(dan)黃重量。取蛋(dan)(dan)黃樣品(pin)2.0g，用20ml高純水(shui)溶解(jie)稀釋混勻，得蛋黃稀釋液（0.1g/ml）。取蛋黃(huang)稀釋液1.0ml于 具(ju)塞(sai)離心管中，加無水乙醇1.0ml，渦旋混勻，加乙mi3.0ml，石油醚3.0ml，渦(wo)旋混合，將混合液離心（4000r/min），使液(ye)體分層(ceng)(ceng)，取(qu)上 層(ceng)(ceng)有機相(xiang)；下層(ceng)(ceng)再加入2.0ml**和2.0ml石油醚進行萃取，合并上層萃取液，氮吹儀(yi)吹干(gan)（溫度<30℃），0.5ml乙醇(chun)溶解(jie)，經 0.45μm有機微(wei)孔濾(lv)膜過濾(lv)后，上機檢(jian)測。

5.結果與討論

6.標準工作曲(qu)線(xian)

    配制好(hao)的系列膽固醇標(biao)準溶液，在設(she)定好(hao)的色譜條件下(xia)進行色譜分析，進樣量為20μL，保留時間為6.72min，每個濃(nong)度標準溶液重復進樣三次(ci)，以(yi)峰高H（mAU）為縱(zong)坐(zuo)標，膽固(gu)醇標準溶液濃度C(g/L)為橫(heng)坐標，繪(hui)制標準(zhun)工作曲線(xian)，線(xian)性回歸方程(cheng)為H=76.45C-0.052，相關系數r=0.9991。

7.蛋黃中膽(dan)固醇含量

    將處理好的蛋黃(huang)樣品取樣測試，進樣量20μL，在6.72min膽固(gu)(gu)醇被(bei)洗脫出來，蛋(dan)黃其他(ta)組分(fen)能與膽固(gu)(gu)醇有(you)效分(fen)離(li)，不(bu)干擾(rao)膽固(gu)(gu)醇的測定。由膽固(gu)(gu)醇標準曲(qu)線回歸(gui)方程計(ji)算膽固(gu)(gu)醇含量(liang)。（液相圖譜件見圖1，結(jie)果見(jian)表1）

圖(tu)1 蛋(dan)黃(huang)膽固醇液相圖(tu)譜



表1 蛋黃膽固醇(chun)含量

8.結論

    本(ben)文建立了利用反相液相色(se)譜法(fa)快速測(ce)定蛋(dan)黃中(zhong)(zhong)(zhong)膽固醇(chun)的方法(fa)，樣品無需(xu)皂化處理(li)，直(zhi)接用乙mi和(he)石油(you)醚進(jin)行(xing)萃取，大(da)大(da)節(jie)約了樣品前(qian)處理(li)時間，操(cao)作快速簡便， 具(ju)有良(liang)好的準確度和(he)重現性(xing)，可做為測(ce)定蛋(dan)黃中(zhong)(zhong)(zhong)膽固醇(chun)含量的有效方法(fa)。另膽固醇(chun)主要來自(zi)人體自(zi)身(shen)合(he)成(cheng)，食物中(zhong)(zhong)(zhong)的膽固醇(chun)是次要補(bu)充。一般常人每日從食物中(zhong)(zhong)(zhong)攝(she)取 膽固醇(chun)200mg，即可滿足身體需要(yao)。專家建議每天攝入50mg-300mg膽固醇(chun)為佳(jia)。